Fosforilinimo modifikacija
Fosforilintų baltymų ir peptidų tyrimai gali padėti žmonėms išsiaiškinti minėto proceso mechanizmą ir geriau suprasti gyvenimo veiklos pobūdį. Pastaraisiais metais, nuolat tobulėjant proteomikos technologijoms, baltymų fosforilinimo tyrimams skiriama vis daugiau dėmesio. Daugelis natūralių toksinų ir patogenų taip pat daro savo poveikį keisdami tarpląstelinių baltymų fosforilinimo būseną.
Fosforilinti polipeptidai daugiausia reiškia Ser, Tyr ir Thr. Likučio šoninės grandinės hidroksilo grupė yra modifikuota į rūgštinį fosfatinį polipeptidą. Iki šiol polipeptidų fosforilinimo modifikavimas daugiausia apima post{1}}fosforilinimo metodą ir du sintezės metodus:
Modifikavus monomero metodu, fosforilinta aminorūgštis sunkiai kondensuojasi su peptidine grandine dėl didesnės šoninės grandinės modifikavimo grupės sukeltos sterinės kliūties, o vėliau aminorūgšties įvedimas bus sunkesnis. Ypač kai jame yra daug fosforilinimo vietų modifikacijų, sintezė taps itin sudėtinga, o galutinis produktas turi sudėtingų komponentų, jį sunku atskirti ir jo išeiga yra itin maža. Todėl, kai fosforilinamos kelios peptidinės grandinės vietos, galima apsvarstyti post-fosforilinimo metodą. Pagrindinis sintezės procesas yra selektyviai pašalinti aminorūgščių, kurios turi būti žymimos, šoninės grandinės apsaugines grupes pasibaigus polipeptido sintezei. Tyr, Thr aminorūgštys su neapsaugotomis šoninėmis grandinėmis gali būti naudojamos tiesiogiai reakcijai. Šoninės grandinės apsauginė grupė esant 1% TFA/DCM Ji gali būti kiekybiškai pašalinta tam tikromis sąlygomis. Po-fosforilinimo metu gali būti naudojamas bisbenzilfosforamiditas. Tetrazolas sukuria fosforamidito tetrazolo aktyvų tarpinį produktą, kuris yra prijungtas prie hidroksilo grupės, o po to oksiduojamas peroksirūgšties sąlygomis, kad susidarytų fosforilo grupė, kuri užbaigtų reakciją.
- Teikiame pSer, pTyr, pThr ir D-pSer, D-pTyr, D-pThr fosforilinimo modifikavimo paslaugas.
- Vienu metu galima atlikti 2 vietų, 3 vietų, 4 vietų ir 5 vietų fosforilinimo modifikacijas.
Fosforilinti peptidaiSintetinis korpusas (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) palauk)
1. Sekoje yra 4 fosforilinimo vietos (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), grynumas yra 95%, o užbaigimo ciklas yra 3 savaitės.
